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上海邦景實業有限公司
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更新時間:2022-11-30 09:27:28瀏覽次數:168
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商品屬性:
產品名稱:人乳腺癌細胞:MDA-MB-231
貨號:BJ-X96469
規格:1×10?cells/T25培養瓶
分類:細胞系
商品介紹:
名稱 MDA-MB-231 (人乳腺癌細胞) 種屬 人類 年齡(性別) 女性,69歲 組織來源 乳腺,乳房;源自轉移部位:胸腔積液 生長特性 貼壁細胞 細胞形態 上皮細胞樣 背景描述 MCF7 [MCF-7]細胞保留了多個分化了的乳腺上皮的特性,包括:能通過胞質雌激素受體加工雌二醇并能形成圓形復合物。MCF7 [MCF-7]細胞含有Tx-4癌基因;腫瘤壞死因子α可以抑制MCF7 [MCF-7]細胞的生長,抗雌激素處理MCF7 [MCF-7]細胞能調變IGFBP'S的分泌。 生物安全等級 1 生長培養基 MEM+0.01mg/ml Insulin+10% FBS+1% P/S 推薦傳代比例 1:2-1:3 推薦換液頻率 2~3次/周 倍增時間 ~30-72小時 凍存條件 凍存液:55% 基礎培養基+40%FBS+5%DMSO 溫度:液氮 培養條件 氣相:空氣,95%;CO2,5% 溫度:37℃ 受體表達情況 estrogen receptor, expressed 抗原表達情況 Blood Type O; Rh+ 基因表達情況 insulin-like growth factor binding proteins (IGFBP) BP-2; BP-4; BP-5 保藏機構 ATCC; CRL-12584 ATCC; HTB-22 BCRC; 60436 BCRJ; 0162 DSMZ; ACC-115 ECACC; 86012803 |
細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:產品僅用于科研
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
操作要點:
1)將培養基在37℃水浴鍋預熱;準備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預熱培養基。
2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復溫(可準備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內,再逐步轉移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內*解凍,使細胞能盡快通過最易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內,將管內細胞轉移至準備好的離心管內,輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次,均轉移至離心管內。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養基,吹打制成細胞懸液。
5)將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內,補加適量的培養基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內培養。
6)第二天觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養,待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代,細胞活力恢復后才能進行后續的實驗。
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重組人腫瘤壞死因子
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