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上海莼試生物技術(shù)有限公司
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堿性蛋白酶測(cè)試盒NP酶活性計(jì)算
2021-12-1 閱讀(1813)
堿性蛋白酶測(cè)試盒NP酶活性計(jì)算：
（1）按蛋白濃度計(jì)算 NP活性單位（U）定義：30℃每毫克蛋白每分鐘水解產(chǎn)生1μmol為一個(gè)酶活單位。NP活性（U/mgprot）=C標(biāo)準(zhǔn)品×△A測(cè)定÷△A標(biāo)準(zhǔn)×V1÷（Cpr×V2）÷T =0.125×△A測(cè)定÷△A標(biāo)準(zhǔn)÷Cpr
（2）按樣本鮮重計(jì)算 NP活性單位（U）定義：30℃每克樣品每分鐘催化水解產(chǎn)生1μmol為一個(gè)酶活單位。NP活性（U/g鮮重）=C標(biāo)準(zhǔn)品×△A測(cè)定÷△A標(biāo)準(zhǔn)×V1÷（W×V2÷V3）÷T =0.125×△A測(cè)定÷△A標(biāo)準(zhǔn)÷WC標(biāo)準(zhǔn)品：標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度，0.25μmol/mL；Cpr：粗酶液蛋白質(zhì)濃度，mg/mL；W：樣品鮮重，g； V1：酶促反應(yīng)總體積，0.1mL；V2：加入反應(yīng)體系中粗酶液體積，20µL=2×10-2mL；V3：粗酶液總體積，1mL； T：催化反應(yīng)時(shí)間，10min。 注意：若反應(yīng)較弱，（A測(cè)定管－A對(duì)照管）差值較小，可適當(dāng)延長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間（20-30min），即步水浴時(shí)間，最后計(jì)算酶活時(shí)對(duì)公式進(jìn)行修改。
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